12 сентября 2025 года в Мизано началась практика для пилотов MotoGP, Moto3, Moto2 и MotoE. Условия на трассе были сложными из-за скользкого асфальта, что повлияло на выступление гонщиков, в том числе Франко Морбиделли, который, несмотря на штрафы за прошлые ошибки, смог показать лучшее время сессии — 1:31.342. Второе место занял Фабио Куартараро, а Фабио Ди Джианантонио замкнул тройку. Братья Маркесы также оказались в числе лидеров: Марк возглавил сессию с 1:30.480, а Алекс финишировал пятым с 1:30.752. Лука Марини и Хорхе Мартин обеспечили крепкое присутствие пилотов Aprilia в Q2. В итоге, в топ-10 оказались также Педро Акоста и Фабио Ди Джианантонио. Фабио Куартараро не смог удержаться в десятке и финишировал 12-м, а Энеа Бастианини, дебютировавший на KTM, завершил день 17-м. Августо Фернандес на экспериментальном Yamaha V4 показал 19-й результат.